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ELISA试剂盒真伪辨别?

2018-09-04 浏览次数:370

近年来,随着国内生物医学的发展越来越大,一些不良商家开始卖一些假冒试剂盒,给科研工作者带来了很多的麻烦,浪费了标本,还影响了实验进程。小编特整理了一些鉴别假冒伪劣ELISA试剂盒的方法供广大科研工作者和用户参考,希望对广大科研工作者有所帮助。

 

购买前

【方法一】向厂家索要或下载说明书,查找ELISA的性能指标:准确度(加标回收率、稀释线性)、精密度(板内差、板间差)、灵敏度、样本值、特异性、校准。一般来说,除了校准不一定每份说明书都有外,其余的指标一般都需要罗列(部分样本需要高倍稀释的,可能没有准确度这个指标)。如果无法提供这些性能指标,则说明该试剂盒可能是假货,或者试剂盒开发过程不够科学严谨,有可能无法检测出真实的样本值。

 

【方法二】对于夸大ELISA涵盖的指标的范围,尤其是不常见的种属,可先去国际知名ELISA试剂盒供应商(如eBioscienceR&D)上搜索,如果搜索不到该种属的ELISA试剂盒,则有可能是假货,需要小心谨慎。

 

【方法三】将“厂家名”、“ELISA”和“假货”等关键词在网上搜索,有的论坛如丁香园等会有打假曝光台。


购买后

【方法一】检查说明书、包装盒的质量,通常假冒伪劣产品为了降低成本,印刷的质量会比较差。其次仔细阅读说明书,如上所示查找ELISA的性能指标。

 

【方法二】

I.如果购买了两盒同一公司的ELISA试剂盒A和B,利用交叉实验即可鉴别ELISA试剂盒是否造假,方法如下:

(1) 取出购买的试剂盒A的包被板两条。

(2) 一条包被板加试剂盒A的标准品做标准曲线。

(3) 另一条包被板加试剂盒B的标准品做标准曲线。

(4) 后续操作按照试剂盒说明书进行,加检测抗体、酶复合物和底物。

(5) 实验完毕后,检测两条标准曲线,如果两条标准曲线一致则说明两个ELISA试剂盒检测的同一个指标而非A和B,即该试剂盒为伪劣假造ELISA试剂盒。

(6) 如果两条标准曲线不一致则说明两个ELISA试剂盒检测的不同指标,试剂盒A只能检测A,不能检测B,即该试剂盒为正常的ELISA试剂盒。

 

II. 利用干扰实验即可鉴别ELISA试剂盒是否检测目的抗原,方法如下:

(1) 将针对试剂盒特异性的重组蛋白抗原和试剂盒中的检测抗体配置成antibody: antigen= 1:2的混合孵育液

(2) 37℃孵育15分钟后,代替原试剂盒中的检测抗体

(3) 后续操作按照试剂盒说明书进行,加检测抗体、酶复合物和底物

(4) 实验完毕后,检测其标准曲线,如果标准曲线良好则说明加入的目的抗原和试剂盒抗体不匹配,试剂盒检测抗体针对的是非目的抗原,该试剂盒为伪劣假造ELISA试剂盒。

(5) 如果标准曲线无线性,则说明试剂盒检测抗体已被目的抗原中和或干扰,影响了其实际试剂盒抗体的检测作用,则该试剂盒检测抗体针对的是目的抗原。

 

 

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